早期的液相層析法分離是利用重力來分離所以相當耗時，且分離管通常只用一次，使用後就拋棄，因此每次都需要重填新的管柱，對材料和人力都是相當浪費的。1960年代末期高效液相層析法 (HPLC) 被開發出來，由於 HPLC 具有高靈敏度，可準確進行定量及定性之分析，因此近年來快速發展成普遍的分析儀器。其基本原理為利用高壓溶劑泵 (High Pressure Pump) 的加壓來產生動力，促使液體移動相(Mobile Phase)在沖堤過程中帶動分析物流經固定相 (Stationary Phase)，藉著分析物與固定相之作用力不同，而管柱中會有不同的滯留程度。移動相、固定相、樣品三者的作用力不同，產生一個分配平衡 (Distribution Equilibrium)，由各個分析物之平衡狀況不同，而產生分離現象，在經過偵測器 (Detector) 的測定，已確定分析物的存在。

HPLC 實驗之主儀器為 JASCO公司 (JASCO Corporation, Tokyo, Japan) 之 HPLC 系統；主要配備包含 LC-NETII / ADC 通訊設備、PU-4180 幫浦、UV-4075 偵測器。另使用層吸管柱恆溫箱 (Super co-150) 控制管柱所在之環境溫度。